1、范圍

 

    本標準適用于以甲萘醌或甲萘氫醌單醋酸酯和植物醇(包括天然植物醇和異植物醇)為主要原料,經(jīng)化學(xué)合成而制得的食品營(yíng)養強化劑植物甲萘醌(維生素K1)。

 

 

2  化學(xué)名稱(chēng)、分子式、結構式和相對分子質(zhì)量

 

2.1  化學(xué)名稱(chēng)

 

    2-甲基-3-(3,7,11,15-四甲基十六-2-烯基)-1,4-萘醌的反式和順式異構體的混合物

 

2.2  分子式

 

    C₃₁H₄₆O₂

 

2.3  結構式

 

 

2.4  相對分子質(zhì)量450.71(按2022年國際相對原子質(zhì)量)

 

 

3、技術(shù)要求

 

3.1  感官要求

 

    感官要求應符合表1的規定。

 

表1感官要求

 

項目	要求	檢驗方法
色澤	黃色至橙色	取適量試樣,均勻置于清潔、干燥的白瓷盤(pán)或透明燒杯中,在自然光下,觀(guān)察其色澤和狀態(tài),嗅其氣味
氣味	無(wú)臭或幾乎無(wú)臭
狀態(tài)	黏稠液體,澄清

 

 

3.2  理化指標理

 

    化指標應符合表2的規定。

 

表2理化指標

 

 

項目		指標	檢驗方法
含量	總植物甲萘醌,w/%	97.0~103.0	附錄A中A.3
	順式植物甲萘醌,%                                            ≤	18.0
紫外吸光度比值(A254nm/A249nm)		0.70~0.75	附錄A中A.4
折光率,n20D		1.525~1.528	GB/T614
甲萘醌,w/%                                                                 ≤		0.2	附錄A中A.5
鉛(Pb)/(mg/kg)                                                           ≤		2.0	GB5009.75或GB5009.12
重金屬(以Pb計)/(mg/kg)                                                 ≤		20	GB5009.74
砷(以As計)/(mg/kg)                                                       ≤		2.0	GB5009.76或GB5009.11
總有機溶劑殘留(正己烷、甲苯、甲醇、丙酮和正庚烷之和)/(mg/kg)  ≤		250	附錄A中A.6
正己烷/(mg/kg)                                                            ≤		50
甲苯/(mg/kg)                                                               ≤		50
甲醇/(mg/kg)                                                               ≤		50
注1:商品化的植物甲萘醌產(chǎn)品應以符合本標準的植物甲萘醌為原料,添加工藝所必需的食品原料和/或食品添加劑作為輔料,其質(zhì)量、范圍和使用量應符合相應的食品安全國家標準。 注2:生產(chǎn)溶劑為石油醚、正己烷、甲苯、甲醇、丙酮和正庚烷。

 

附錄A檢驗方法

 

A.1  一般規定本標準所用試劑和水,除特別說(shuō)明,均指分析純試劑和GB/T6682中規定的三級水及以上試驗用水。試驗中所用標準溶液、雜質(zhì)測定用標準溶液、制劑及制品,在沒(méi)有注明其他要求時(shí),均按GB/T601、GB/T602、GB/T603的規定制備。試驗中所用溶液在未注明用何種溶劑配制時(shí),均指水溶液。除另有規定外,吸收峰波長(cháng)應在該品種項下規定的波長(cháng)±2nm以?xún)?并以吸光度最大的波長(cháng)作為測定波長(cháng)。一般試樣溶液的吸光度讀數以0.3~0.7為宜。

 

A.2  鑒別試驗

 

A.2.1  顯色反應

 

A.2.1.1  試劑和材料

 

A.2.1.1.1甲  醇。

 

A.2.1.1.2  氫氧化鉀。

 

A.2.1.1.3  5%氫氧化鉀-甲醇溶液:稱(chēng)取5.0g氫氧化鉀,置于燒杯中,加100mL甲醇使其溶解,密閉避光放置過(guò)夜,取上部澄清液使用。溶液變黃褐色應重新配制。

 

A.2.1.2  分析步驟取試樣1滴,置于比色管中,先加10mL甲醇,再加1mL5%氫氧化鉀-甲醇溶液,振搖,溶液應顯綠色。置于沸水浴中應顯深紫色,隨后變?yōu)榧t棕色。

 

A.2.2  紅外吸收光譜采用ATR法或膜法,按照GB/T6040進(jìn)行試驗,試樣的紅外光譜應與對照圖譜一致,對照圖譜見(jiàn)附錄B中圖B.1。

 

A.2.3  紫外吸收峰

 

A.2.3.1  試劑和材料異辛烷。

 

A.2.3.2  儀器和設備

 

A.2.3.2.1紫外分光光度計。

 

A.2.3.2.2  電子天平,感量0.0001g。

 

A.2.3.3  試樣溶液的制備稱(chēng)取0.025g(精確至0.0001g)試樣,用異辛烷溶解并定容至50mL,搖勻。吸取溶液1mL,用異辛烷溶解并定容至50mL,搖勻,作為試樣溶液備用。

 

A.2.3.4  分析步驟將試樣溶液(A.2.3.3)注入1cm石英比色皿,以異辛烷為參比溶液,測定試樣溶液的吸光度,在243nm、249nm、261nm和270nm波長(cháng)處應有最大吸收,在228nm、246nm、254nm和266nm波長(cháng)處應有最小吸收。

 

A.3  總植物甲萘醌和順式植物甲萘醌含量的測定

 

A.3.1方法提要試樣用流動(dòng)相溶解,硅膠柱分離,二極管陣列檢測器或紫外檢測器檢測,內標法計算總植物甲萘醌含量,面積百分比法計算順式植物甲萘醌含量。

 

A.3.2  試劑和材料

 

A.3.2.1  正己烷:色譜純。

 

A.3.2.2  正戊醇:色譜純。

 

A.3.2.3  標準物質(zhì):植物甲萘醌(維生素K1)(C31H46O2,CAS號:81818-54-4)的質(zhì)量分數≥99%,或經(jīng)國家認證并授予標準物質(zhì)證書(shū)的標準物質(zhì)。

 

A.3.2.4  苯甲酸膽甾酯(C34H50O2,CAS號:604-32-0)。

 

A.3.3  儀器和設備

 

A.3.3.1  液相色譜儀:配有二極管陣列檢測器或紫外檢測器。

 

A.3.3.2  電子天平:感量0.0001g。

 

A.3.3.3  參考色譜條件如下。

 

    a)色譜柱:多孔二氧化硅(硅膠)微粒填料的色譜柱(250mm×4.6mm,粒徑5μm),或其他等效色譜柱。

 

    b)檢測器波長(cháng):254nm。

 

    c)柱溫:30°C。

 

    d)流動(dòng)相:正己烷+正戊醇=800+1(V+V)。

 

    e)流速:1.0mL/min。f)進(jìn)樣量:50μL。

 

A.3.4  分析步驟

 

A.3.4.1  標準溶液的制備內標溶液:稱(chēng)取適量苯甲酸膽甾酯,用流動(dòng)相溶解,配制成濃度約為2.5mg/mL的溶液,搖勻,備用。標準溶液:稱(chēng)取約100mg植物甲萘醌標準物質(zhì)(精確至0.0001g),置于10mL棕色容量瓶中,用流動(dòng)相溶解并定容,作為標準儲備液。臨用時(shí)用流動(dòng)相稀釋成濃度約為0.1mg/mL的標準溶液,準確吸取10mL標準溶液和7mL內標溶液,移入25mL棕色容量瓶中,用流動(dòng)相定容至刻度,搖勻,即為標準工作溶液。

 

A.3.4.2  試樣溶液的制備稱(chēng)取一定量(精確至0.0001g)試樣,置于棕色容量瓶中,用流動(dòng)相定容,搖勻,使植物甲萘醌含量約為0.1mg/mL。準確吸取10mL置于25mL棕色容量瓶中,再加入7mL內標溶液,用流動(dòng)相定容至刻度,搖勻,即為試樣溶液。色譜分析前用0.45μm微孔濾膜過(guò)濾。

 

A.3.4.3  測定在A(yíng).3.3.3參考色譜條件下,吸取試樣溶液和標準工作溶液分別注入液相色譜儀,記錄所得的試樣溶液和標準工作溶液中內標物質(zhì)峰面積和植物甲萘醌的峰面積。順式植物甲萘醌與反式植物甲萘醌的分離度至少為1.5。液相色譜圖見(jiàn)圖B.2。

 

A.3.5  結果計算

 

A.3.5.1  試樣中總植物甲萘醌含量計算試樣中總植物甲萘醌的質(zhì)量分數CX,數值以%表示,按式(A.1)

 

計算:

 

 

式中:

 

    AS———標準工作溶液中內標物質(zhì)峰面積;

 

    CS———標準工作溶液中內標物質(zhì)含量,單位為毫克每毫升(mg/mL);

 

    AR———標準工作溶液中總植物甲萘醌峰面積;

 

    CR———標準工作溶液中總植物甲萘醌的含量,單位為毫克每毫升(mg/mL);

 

    AX———試樣溶液中的總植物甲萘醌峰面積;

 

    A'S———試樣溶液中內標物質(zhì)峰面積;

 

    C'S———試樣溶液中內標物質(zhì)含量,單位為毫克每毫升(mg/mL);

 

    V———試樣的定容體積,單位為毫升(mL);

 

    m———試樣的質(zhì)量,單位為克(g);

 

100———換算系數(將結果轉換為%);

 

1000———換算系數(將毫克轉換為克)。

 

A.3.5.2  試樣中順式植物甲萘醌含量計算

 

試樣中順式植物甲萘醌的含量CZ,數值以%表示,按式(A.2)計算:

 

C_Z=AZ/(AZ+AE)×100........................(A.2)

 

式中:

 

AZ———試樣中順式植物甲萘醌峰面積;

 

AE———試樣中反式植物甲萘醌峰面積。

 

試驗結果以?xún)纱纹叫袦y定結果的算術(shù)平均值表示。結果保留到小數點(diǎn)后1位。在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不大于算術(shù)平均值的2.0%。

 

A.4  紫外吸光度比值的測定

 

A.4.1  方法提要

 

    以異辛烷為參比溶液,測定植物甲萘醌溶液在波長(cháng)254nm、249nm處的吸光度,計算其紫外吸光度比值。

 

A.4.2  分析步驟

 

    將試樣溶液(A.2.3.3)注入1cm石英比色皿,以異辛烷為參比溶液,分別測定在波長(cháng)254nm、249nm處的吸光度。

 

A.4.3  結果計算

 

    紫外吸光度比值X按式(A.3)計算:

 

    X=A_254/A₂₄₉........................(A.3)

 

    式中:

 

    A₂₅₄———試樣溶液在254nm處測得的吸光度;

 

    A₂₄₉———試樣溶液在249nm處測得的吸光度。

 

    試驗結果以?xún)纱纹叫袦y定結果的算術(shù)平均值表示。在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不大于算術(shù)平均值的1.0%。

 

 

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