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      T/SHAAV021-2024混合型飼料添加劑 甜味劑中糖精鈉、紐甜、新甲基橙皮苷二氫查耳酮的測定

      發(fā)布時(shí)間:2024-06-07 10:02:13

       

       

       

      1、范圍

       

          本文件規定了混合型飼料添加劑甜味劑中糖精鈉、紐甜、新甲基橙皮苷二氫查耳酮的高效液相色譜測定方法。


          本文件適用于混合型飼料添加劑甜味劑中糖精鈉、紐甜、新甲基橙皮苷一氫查耳酮的測定。

       

          本方法糖精鈉檢出限為200 mgkg、紐甜檢出限為50 mgg、新甲基橙皮苷二氫查耳酮檢出限為20mg/kg,糖精鈉定量限為400 mgkg、紐甜定量限為100 mgkg、新甲基橙皮苷二氫查耳酮定量限為40 mg/kg

       


      2 規范性引用文件


          下列文件中的內容通過(guò)文中的規范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中,注日期的引用文件該日期對應的版本適用于本文件:是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。


          GB/T6682分析實(shí)驗室用水規格和試驗方法


          GB/T20195動(dòng)物飼料試樣的制備

       


      3術(shù)語(yǔ)和定義


          本文件沒(méi)有需要界定的術(shù)語(yǔ)和定義。

       


      4 原理


          混合型飼料添加劑甜味劑充分溶解在30%的乙腈水溶液后用配有紫外(UV)檢測器或二極管陣列(DAD)檢測器的高效液相色譜儀測定,外標法定量計算出糖精鈉、紐甜、新甲基橙皮苷二氫查耳酮的含量。

       

       

      寵物飼料樣圖


      5 試劑與材料


          除非有特殊說(shuō)明,本測定方法中所用試劑均為分析純,水為GB/T6682規定的1·級水。

       

      5.1 乙腈(色譜級)


      5.2 磷酸氫二銨。


      5.3 磷酸。


      5.4 糖精鈉標準品(CAS:6155-57-3):純度>99%


      5.5 紐甜標準品(CAS:165450-17-9):純度>98%。


      5.6 新甲基橙皮苷氫查耳酮標準品(CAS:20702-77-6):純度>99.5%。5.7 0.02 mol 磷酸氫二銨緩沖溶液:稱(chēng)取 2.64g磷酸氫二銨,加入 700mL, 水,用磷酸調 pH 至 2.5,定容到1000mL容量瓶中,用0.45um 濾膜抽濾。

       

      橙皮素二氫查耳酮標準品


      5.8 糖精鈉、紐甜、新甲基橙皮昔二氫查耳酮標準溶液:稱(chēng)取0.1g(精確至0.00001g)預先在 120℃烘箱烘干 4h 的糖精鈉標準品(5.4)、0.1g(精確至 0.00001g)紐甜標準品(5.5)、0.1g(精確至 0.00001g)新甲基橙皮苷二氫查耳酮標準品(5.6)于100mL,容量瓶中,加入 30%乙腈水溶液定容,搖勻靜置。此溶液糖精鈉濃度為1mg/m,組甜濃度約為1mg/m、新甲基橙皮苷二氫查耳酮濃度為1mg/mL。

       

      5.9 糖精鈉、組甜、新甲基橙皮苷二氫查耳酮標準工作溶液:分別吸取 0.1mL,0.5mL,1mL,5mL,10mL糖精鈉、紐甜、新甲基橙皮苷一氫査耳酮標準溶液至10 mL,容量瓶中,用 30%乙腈水溶液定容,臨用現配。

      5.10 水性微孔濾膜:孔徑0.45 m。

       


      6 儀器與設備


      6.1  分析天平:感量 0.00001g,感量0.0001g.


      6.2 超聲波震蕩器。


      6.3 高效液相色譜儀:配有紫外(UV)檢測器或二極管陣列(DAD)測器。

       


      7 試樣制備與保存


          按GB/T20195制備樣品,至少200g;粉碎使其全部通過(guò)0.42mm孔徑的分析篩,充分混勻,裝入口瓶中,避光保存,備用。

       


      8 測定步驟


      8.1 樣品溶液制備


          稱(chēng)取試樣 0.5g(精確至 0.0001g)于50m,燒杯中,加入適量30%乙腈水溶液超聲波震蕩提取10min;將提取液移入 100m 容量瓶中使用 30%乙腈水溶液定容,搖勻靜置。提取液經(jīng) 0.45um 濾膜過(guò)濾后用于色譜分析。


      8.2 高效液相色譜參考條件


      a) 色譜柱:Cs柱,柱長(cháng)250mm,內徑4.6mm,粒度5pm:


      b) 流動(dòng)相:乙腈+0.02moL磷酸氫二銨緩沖溶液-35+65;


      c) 流速:1mL/min;d)檢測波長(cháng):糖精鈉、新甲基橙皮苷二氫査耳酮檢測波長(cháng)283nm;紐甜檢測波長(cháng)210nm。e)杜溫:30℃℃:


      f) 進(jìn)樣體積:10L。


      8.3 標準系列工作溶液和試樣溶液測定


          分別吸取糖精鈉、紐甜、新甲基橙皮苷二氫查耳酮標準工作溶液和試樣溶液,按8.2的色譜條件進(jìn)行色譜分析測定。測定時(shí),樣品溶液與標準工作溶液等體積進(jìn)樣測定,并保證樣品溶液中的響應值均應在標準工作曲線(xiàn)的線(xiàn)性范圍內,試樣溶液中待測物超出線(xiàn)性范圍時(shí)適當稀釋后再用于色譜分析。糖精鈉、紐甜、新甲基橙皮苷一氫查耳酮標準溶液的高效液相色譜圖參見(jiàn)附錄A。

       


      9 結果計算與表述


          試樣中糖精鈉、紐甜和新甲基橙皮苷二氫査耳酮的含量w,以質(zhì)量分數“%”表示,按下式計算:

       

      計算式


          式中:


          c-由標準曲線(xiàn)得出的試樣中糖精鈉、紐甜、新甲基橙皮首二氫査耳酮的濃度,單位為毫克每毫升(mg/mmL):


          V一試樣溶液總體積,單位為毫升(mL);


          n-稀釋倍數;


          m-試樣的質(zhì)量,單位為克(g);


          測定結果用平行測定的算術(shù)平均值表示,結果保留至小數點(diǎn)后2位。

       


      10 精密度


          在重復性條件下,兩次獨測定結果與其算術(shù)平均值的絕對差值不大于該算術(shù)平均值的5%。

       

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