T/SSFS 0010-2024

 

1 范圍

 

    本文件規定了番茄及其制品（番茄汁、番茄醬、番茄干粉和番茄籽油）中六氫番茄紅素和八氫番茄紅素的高效液相色譜測定方法。

 

    本文件適用于番茄及其制品（番茄汁、番茄醬、番茄干粉和番茄籽油）中六氫番茄紅素和八氫番茄紅素的測定。

 

 

2 規范性引用文件

 

    下列文件中的內容通過(guò)文中的規范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。

 

    GB/T 6682 分析實(shí)驗室用水規格和試驗方法

 

 

3 術(shù)語(yǔ)和定義

 

本文件沒(méi)有需要界定的術(shù)語(yǔ)和定義。

 

 

4 原理

 

    試樣中的六氫番茄紅素和八氫番茄紅素經(jīng)提取劑提取、濃縮，用高效液相反相色譜法分離，紫外檢測器或二極管陣列檢測器檢測，外標法定量。

 

 

5 試劑和材料

 

    除非另有說(shuō)明，本方法所用試劑均為分析純，水為符合GB/T 6682規定的一級水。

 

5.1  甲醇(CH3OH)：色譜純。

 

5.2  甲基叔丁基醚[CH3OC(CH3)3，MTBE]：色譜純。

 

5.3  正己烷(C6H14)。

 

5.4  丙酮（CH3COCH3）。

 

5.5  乙酸乙酯（C4H8O2，EA）。

 

5.6  提取液：正己烷：甲醇：丙酮（2：1：1，v/v/v）按體積比混勻備用。

 

5.7  稀釋液：甲醇：甲基叔丁基醚（1：1，v/v）按體積比混勻備用。

 

5.8  六氫番茄紅素（C40H62）：純度≥97%。

 

5.9  八氫番茄紅素（C40H64）：純度≥97%。

 

5.10  六氫番茄紅素標準儲備液（1 mg/mL）：準確稱(chēng)取1 mg六氫番茄紅素（5.8）于1 mL棕色容量瓶，用少量乙酸乙酯溶解并定容至刻度，-20 °C避光密封保存。有效期不超過(guò)7天。儲備液臨用前應回溫至室溫，并按附錄B的規定校正。

 

5.11  八氫番茄紅素標準儲備液（1 mg/mL）：準確稱(chēng)取1 mg八氫番茄紅素（5.9）于1 mL棕色容量瓶，用少量乙酸乙酯溶解并定容至刻度，-20 °C避光密封保存。有效期不超過(guò)7天。儲備液臨用前應回溫至室溫，并按附錄B的規定校正。5.12六氫番茄紅素標準中間液（0.5 mg/mL）：準確移取0.5 mL六氫番茄紅素標準儲備液（5.10）于1 mL容量瓶中，用稀釋液（5.7）定容至刻度，得到質(zhì)量濃度為0.5 mg/mL的標準中間液?，F用現配。

 

5.13  八氫番茄紅素標準中間液（0.5 mg/mL）：準確移取0.5 mL八氫番茄紅素標準儲備液（5.11）于1 mL容量瓶中，用稀釋液（5.7）定容至刻度，得到質(zhì)量濃度為0.5 mg/mL的標準中間液?，F用現配。

 

5.14  六氫番茄紅素標準工作溶液：準確移取一定體積的六氫番茄紅素標準中間液（5.12）于5 mL容量瓶中，用稀釋液（5.7）定容至刻度，得到質(zhì)量濃度為2.5 μg/mL、5 μg/mL、7.5 μg/mL、10 μg/mL、12.5 μg/mL、20 μg/mL、50 μg/mL的系列標準工作液?，F用現配。

 

5.15  八氫番茄紅素標準工作溶液：準確移取一定體積的八氫番茄紅素標準中間液（5.13）于5 mL容量瓶中，用稀釋液（5.7）定容至刻度，得到質(zhì)量濃度為2.5 μg/mL、5 μg/mL、7.5 μg/mL、10 μg/mL、12.5 μg/mL、20 μg/mL、50 μg/mL的系列標準工作液?，F用現配。

 

 

6 儀器設備

 

6.1  高效液相色譜儀：配有紫外檢測器或二極管陣列檢測器。

 

6.2  天平：感量為0.1 mg 和0.01 g。

 

6.3  勻漿機。

 

6.4  篩網(wǎng)（14目）。

 

6.5  磁力攪拌器。

 

6.6  真空泵。

 

6.7  旋轉蒸發(fā)儀。

 

6.8  聚四氟乙烯微孔濾膜：0.22 μm。

 

 

7 樣品制備

 

    新鮮番茄：取一定數量的有代表性的樣品，去蒂切塊，用勻漿機（6.3）破碎30 s，過(guò)14目篩網(wǎng)（6.4）去除絕大多數皮和籽，得到番茄漿，轉移至錐形瓶，備用。

 

    番茄汁：依據產(chǎn)品中番茄的添加量，取相當于含新鮮番茄15 g～20 g的樣品至錐形瓶，備用。

 

    番茄醬：充分攪勻樣品，取0.5 g番茄醬至錐形瓶，備用。

 

    番茄干粉：充分混勻樣品，取0.5 g番茄干粉至錐形瓶，備用。

 

    番茄籽油：轉動(dòng)并翻轉裝滿(mǎn)樣品的容器，攪勻，取0.5 g番茄籽油至錐形瓶，備用。

 

 

附 錄A

（資料性）

六氫番茄紅素和八氫番茄紅素的色譜圖

 

A.1 六氫番茄紅素色譜圖

 

六氫番茄紅素色譜圖，見(jiàn)圖A.1與圖A.2。

 

注：此圖顯示標準品中六氫番茄紅素主要含5種同分異構體，分別為順式六氫番茄紅素1（P1，保留時(shí)間：9.752 min）、順式六氫番茄紅素2（P2，保留時(shí)間：9.993 min）、全反式六氫番茄紅素（P3，保留時(shí)間：11.529 min）、順式六氫番茄紅素3（P4，保留時(shí)間：12.030 min）和順式六氫番茄紅素4（峰P5，保留時(shí)間：12.869 min）。以5個(gè)峰的峰面積之和作為六氫番茄紅素的峰面積

 

圖A.1 六氫番茄紅素標準品色譜圖（40μg/mL）

 

注：此圖顯示樣品含六氫番茄紅素2種，分別為六氫番茄紅素1（峰1，保留時(shí)間,9.363 min）、六氫番茄紅素2（峰）。

 

 

圖A.2 六氫番茄紅素樣品色譜圖（新鮮番茄）

A.2 八氫番茄紅素色譜圖

 

八氫番茄紅素色譜圖，見(jiàn)圖A.3與圖A.4。

 

注：此圖顯示標準品中八氫番茄紅素主要含2種同分異構體，分別為15順八氫番茄紅素（p1，保留時(shí)間：8.620 min）和全反式八氫番茄紅素（p2，保留時(shí)間：9.086 min）。以2個(gè)峰的峰面積之和作為八氫番茄紅素的峰面積。

 

圖A.3 八氫番茄紅素標準品色譜圖（40μg/mL）

 

注：此圖顯示樣品中含八氫番茄紅素1種（保留時(shí)間：8.311min）。

 

圖A.4 八氫番茄紅素樣品色譜圖（新鮮番茄）

 

 

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