警告：實驗中使用的標準物質(zhì)和有機溶劑均具有一定的毒性，試劑配制和樣品前處理過程應在通風櫥內(nèi)操作，按要求佩戴防護器具，避免直接接觸皮膚和衣物。

 

1　適用范圍

 

本標準規(guī)定了測定水中阿維菌素 B1a 和阿維菌素 B1b 的高效液相色譜法。

 

本標準適用于地表水、地下水、生活污水、工業(yè)廢水和海水中阿維菌素 B1a 和阿維菌素 B1b 的測定。

 

取樣體積 100 mL，進樣體積 20 μL 時，阿維菌素 B1a 和阿維菌素 B1b 的方法檢出限均為 0.03 μg/L，測定下限均為 0.12 μg/L。

 

2、方法原理

 

樣品中阿維菌素 B1a 和阿維菌素 B1b 用二氯甲烷和乙酸乙酯混合溶劑萃取，萃取液經(jīng)凈化后濃縮至干，在 N?甲基咪唑存在下與三氟乙酸酐衍生化反應生成熒光物質(zhì)，用高效液相色譜分離，熒光檢測器檢測。根據(jù)保留時間定性，外標法定量。

 

 

3、試劑和材料除

 

1　乙酸乙酯（C4H8O2）：色譜純。

 

2　甲醇（CH3OH）：色譜純。

 

3　二氯甲烷（CH2Cl2）：色譜純。

 

4　乙腈（CH3CN）：色譜純。

 

5　鹽酸（HCl）：ρ=1.18 g/mL，w∈[36.0%，38.0%]。

 

6 N?甲基咪唑（C4H6N2），純度≥99%。

 

7　三氟乙酸酐（C4F6O3），純度≥99%。

 

8　氫氧化鈉（NaOH）。

 

9　氯化鈉（NaCl）。在 400 ℃下烘烤 4 h，冷卻至室溫，于磨口玻璃瓶中密封保存。

 

10　無水硫酸鈉（Na2SO4）。在 400 ℃下烘烤 4 h，冷卻至室溫，于磨口玻璃瓶中密封保存。

 

11　鹽酸溶液。用鹽酸（5.5）和水按 1∶1 的體積比混合。

 

12　氫氧化鈉溶液：ρ（NaOH）＝0.4 g/mL。稱取 40 g 氫氧化鈉（5.8）溶于 100 mL 水中。

 

13　二氯甲烷?乙酸乙酯混合溶劑。用二氯甲烷（5.3）和乙酸乙酯（5.1）按 3∶1 的體積比混合。

 

14　衍生化試劑Ⅰ。用 N?甲基咪唑（5.6）和乙腈（5.4）按 1∶1 的體積比混合，臨用現(xiàn)配。

 

15　衍生化試劑Ⅱ。用三氟乙酸酐（5.7）和乙腈（5.4）按 1∶2 的體積比混合，臨用現(xiàn)配。

 

16　阿維菌素 B1（a C48H72O14）：純度≥90%。-18 ℃以下冷凍、密封、避光保存。

 

17　阿維菌素 B1（b C47H70O14）：純度≥90%。-18 ℃以下冷凍、密封、避光保存。

 

18　標準貯備液：ρ=100 mg/L。準確稱取 1.0 mg 阿維菌素 B1（a 5.16）、1.0 mg 阿維菌素 B1（b 5.17），用乙腈（5.4）溶解后轉(zhuǎn)移至 10 mL容量瓶，乙腈（5.4）定容至標線。-18 ℃以下冷凍，密封、避光保存，保存期 1 年。亦可購買市售阿維菌素 B1a 有證標準物質(zhì)或阿維菌素 B1b 有證標準物質(zhì)，按照產(chǎn)品說明書保存。

 

19　標準使用液：ρ=10.0 mg/L。準確移取 500 μL 標準貯備液（5.18）至 5 mL 容量瓶中，用乙腈（5.4）稀釋定容至標線，-18 ℃以下冷凍、密封、避光保存，保存期 1 年。

 

20　凈化柱：500 mg/6 mL，填料為石墨化碳黑，或其他等效凈化柱。

 

21　濾膜：孔徑 0.45 μm，聚四氟乙烯或其他等效材質(zhì)。

 

　阿維菌素 B1a 和阿維菌素 B1b 標準溶液衍生物色譜圖

 

標引序號說明：

 

1——阿維菌素 B1b衍生物；

 

2——阿維菌素 B1a衍生物。

 

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